siRNA敲减套餐
本公司诚招全国siRNA代理商
我司合成的siRNA oligo均由HPLC纯化,性价比好,纯度高。使用者只需用RNAase free的水稀释后即可用进行后续实验。
另外可根据客户提供的每条基因设计3-4个靶点的siRNA。即可单独使用又可随意组合,以siRNA Pool 形式提高抑制效率
siRNA三保一套餐价格(5-7工作日)
产品说明 | 规 格 | 纯化方式 | ||
目的基因的siRNA oligos | 3靶点 | 2 OD | HPLC | |
阴性对照siRNA oligos | 1条 | 1 OD | HPLC | |
FAM标记阴性对照siRNA oligos | 1条 | 1 OD | HPLC | |
RNAi阳性对照siRNA oligos | 1条 | 1 OD | HPLC | |
套餐价格 | 1200元 |
siRNA四保一套餐价格(5-7工作日)
产品说明 | 规 格 | 纯化方式 | ||
目的基因的siRNA oligos | 4靶点 | 2 OD | HPLC | |
阴性对照siRNA oligos | 1条 | 1 OD | HPLC | |
FAM标记阴性对照siRNA oligos | 1条 | 1 OD | HPLC | |
RNAi阳性对照siRNA oligos | 1条 | 1 OD | HPLC | |
套餐价格 | 1560元 |
下方为我们自己实验室的一点小心得,分享给大家!
1)本底表达检测:强烈建议在做RNAi实验之前做一下目的基因的本底表达的检测,如果细胞内目的基因的表达量本身就非常低,不用敲就非常
非常低的基因,还要做RNAi?CT值30以上的基因几乎就不表达,就不要做RNAi实验了,去做过表达啊!
2)关于筛选:根据我司多年的经验,对于大部分的细胞,第一次筛选可以在12孔板,设置50nM的终浓度,转染三条siRNA和对照做筛选。
初筛没必要用太多量的细胞(有同学直接在6cm 皿里筛选,多浪费啊),也不用设置太多的浓度梯度和时间点等条件去优化。
如果第一轮靶点敲减效率达不到50%,可以再根据第一轮的实验结果,以敲减效率最高的靶点,进行浓度/收样时间/转染试剂比例
等条件去优化。
3)关于阳参:阳参的siRNA片段,是我司验证的已经文献支持的靶点序列。不做多解释。
对于第一次做RNAi实验的同学,可以拿阳参练手。把细胞培养,转染,定量等体系过一遍再去做正式实验。
因为你很可能细胞养的很挫,转染试剂不合适,RNA抽提不好,反转录定量的体系不好,,,,,,别一结果不好就去怪试剂和我们siRNA
先找找自身的原因。
4)关于转染 :买个好的转染试剂。RNAimax/lipo3000/fugene等等,国内的暂时没有遇到好用的,如果有可以推荐给我。
5)关于投诉:作为生物人,大家都知道siRNA的敲减原理,所以我司只认可qPCR水平的敲减投诉,由于大家都知道的原因,如果客户单独只提 供WB结果来投诉,我司拒绝赔付。大家都是文明人,要讲道理!以理服人,针对客户提供靶点我们合成的siRNA,我司保证质谱检测结果通过后才发货,并可以提供质谱结果,由于客户提供靶点而我们又根据客户要求生产并且质检通过的siRNA的投诉,我司拒绝赔付,因为质控是可以追溯的,细胞的生长状态、转染试剂的批次、用量、收细胞时间、提取RNA的质量、RT的过程、qpcr的步骤以及操作的手法,都是不可控因素,最后、希望大家做好阳性对照!多找找自己原因!!!
常见问题
实验问题 | 原因 | 推荐解决方法 |
siRNA转染靶细胞后qPCR检测干扰效果不佳? | 1)转染效率低 2)本底表达丰度过 3)转染条件不佳 | 1) 调整细胞状态,选择合适的转染试剂,可使用NC-FAM优化转染条件,转染效率要求在80%以上,转染效率低的考虑用慢病毒或腺病毒介导。 2)本底表达丰度过低干扰效果会很不明显。建议更换细胞筛选靶点3)调整siRNA质粒与转染试剂的比例。 |
siRNA转染靶细胞后WB检测干扰效果不佳?
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靶蛋白的半衰期长
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延长干扰时间或改用病毒介导或进行稳转筛选。
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1.质量保证 | 2.发货时间 | 3.售后处理 |
我司产品发货前均经过质量检测,确保您收到的产品质量准确无误! | Generaybio拥有大量的现货产品,本公司的现货产品从订货日期起一周以内即可到货,大大缩短了您的等待时间!另外Generaybio的快速克隆及病毒包装平台也能让您体验到前所未有的快速定制服务! | Generaybio所售出的产品全部登记在册,如果您拿到我们的产品觉得和实质不相符或存在问题,您只需要告诉我们相关产品信息我们会迅速做出反应,为您提供解决方案 |
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