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T7转录试剂盒（生物素标记）
T7 RNA聚合酶（T7 RNA Polymerase），是一种依赖于DNA的RNA聚合酶，对T7启动子具有高度专一性，专门催化5'→3'方向的RNA形成过程。
本试剂盒利用重组T7 RNA聚合酶，以Biotin-NTP Mix为底物，在体外快速、高效合成含生物素标记的、与T7启动子下游的DNA模板反义链互补的RNA。
以线性化质粒为模板制备：
产品优势
快速高效、产量高: 1 μg DNA模板单次反应可产生不低于50 μg的RNA；
应用范围广：可用于RNA Pull-down、Northern Blot、原位杂交等实验；
模板兼容性好：线性化质粒、PCR产物均可用做RNA合成的模板；
无放射性污染：生物素标记RNA。
产品名称 | 货号 | 规格 | 目录价（元） | 保存温度 |
GENESEED®T7 Biotin Labeled RNA Synthesis Kit | R0402 | 3 rxns | 2500 | -20℃ |
1. T7体外生物素标记转录试剂盒1次转录出的探针，能做多少次pulldown实验？
1次转录出的探针，一般可以做2-3次pulldown实验。
2.如何制备DNA模板？
DNA模板主要有两种：PCR产物和线性化质粒。其制备方法分别为：
（1）PCR产物：1）设计引物（上游引物5’端含有T7启动子序列）；2）用高保真DNA聚合酶进行PCR；3）PCR产物电泳后割胶回收。
（2）线性化质粒：1）设计引物（上游引物5’端含有T7启动子序列，下游引物含有可致5’突出端/平末端的酶切位点）；2）用高保真DNA聚合酶进行PCR；3）PCR产物连接克隆载体；4）质粒抽提及酶切线性化
3.转录后RNA如何纯化？
Trizol LS Reagent、磁珠或过柱纯化试剂盒。
4.转录结束后如何去除DNA模板
向反应液中依次添加68 μL RNase-Free Water，10 μL 10× DNase Reaction Buffer，和2 μL RNase-Free DNase I (1 U/μL)，置于PCR仪上37℃孵育15 min。
5.合成的RNA电泳为何有杂带？
原因有2种：1）RNA二级结构所致：RNA未变性电泳会出现“杂带”；2）DNA模板不纯导致合成的RNA电泳有杂带。
6.RNA产量低或无RNA合成
1) 酶保存不当导致酶失活。
2）亚精胺浓度过高会导致DNA模板沉淀，最终导致RNA产量低。
建议将除了酶以外的组分平衡至室温后，再按以下顺序加样：H2O-buffer-NTP-模板-酶;
3) T7启动子缺失或错误，或T7启动子位于模板DNA下游。
说明书下载：GENESEED®T7 Biotin Labeled RNA Synthesis Kit Cat.No. R0402.pdf
