在线客服
客服电话
客服电话
优惠信息
siRNA/miRNA/circRNA
病毒包装
分子生物服务
细胞系服务
分子生物产品
技术中心
关于我们
miRNA 过表达质粒构建与miRNA MIMICS过表达RNA
miRNA的过表达可以通过两种方式实现，一种为构建过表达质粒，模拟细胞内miRNA成熟过程，如果构建到慢病毒载体，后期也可以实现稳转细胞系下的miRNA稳定过表达；另一种方式为通过化学合成的模拟物miRNA MIMICS来实现！下面为我司的2种过表达实现途径！
1：miRNA过表达质粒构建
MicroRNA（miRNA）是一类真核生物内源性的小分子单链RNA，通常长为18~25nt，能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合，引起靶序列降解或抑制其翻译，从而对基因进行转录后的表达调控。
1. 从天然的基因组序列中表达pre-miRNA转录本构建pre-microRNA。插入序列不仅包含pre-miRNA茎环结构，同时构建100-200bp长的上下游两端的侧翼序列。使用使用pol-Ⅱ（如CMV）启动子，这种构建方式保证高水平的表达pre-microRNA。表达出来的pre-miRNA的生理活动尽可能接近天然状态。
使用这种构建方式，客户只需提供miRNA的具体信息及指定过表达载体类型，我们完成序列合成，质粒构建。
目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
A09001 | 质粒型microRNA 过表达载体-1 (pre-miRNA+flanking sequences, ~500bp) | 质粒5ug+甘油菌一管 | ￥2,000 | 1-2周 |
2. 利用我司优化过的载体，模拟内源miRNA-155的表达模块，这种构建方法解决了不同miRNA表达效率差异的问题，同时也有效的避免了有些内源miRNA表达时产生-3p，-5p的问题。miRNA的发夹序列融合在EGFP报告基因的后面，模拟miRNA在体内的成熟过程。
microRNA载体元件信息及用途 | |
特征 | 用途 |
CMV promoter | 高表达目的基因 |
EmGFP | 利用荧光显微镜观察转染效果 |
Blasticidin resistance gene | 可用来筛选稳定细胞系 |
Spectinomycin | 筛选含有已经转化质粒的E. coli |
pUC origin | 质粒可以在E. coli中进行高拷贝 |
目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
A09002 | 质粒型microRNA 过表达载体-2 (pGCMV/EGFP/miR/Blasticidin) | 质粒5ug+甘油菌一管 | ￥1,500 | 1-2周 |
备注：保证插入序列正确，不保证miRNA的过表达效率，不保证转染效率。所有实验仅供科研使用。
microRNA抑制子表达载体
靖瑞百康生物提供两种miRNA抑制子载体构建的方式：
1. ;)PAN>利用靖瑞百康优化过的载体，模拟内源miRNA-155的表达模块，来表达miRNA inhibitor序列。这种构建与靖瑞百康miRNA过表达方式2使用同样的载体系统，方便客户使用同一套系统完成miRNA的过表达与抑制。
使用这种构建方式，客户只需提供miRNA的具体信息，我们完成序列合成，质粒构建。
目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
A09003 | 质粒型microRNA 抑制子载体-1 (pGCMV/EGFP/miR/Blasticidin) | 质粒5ug+甘油菌一管 | ￥1,500 | 1-2周 |
2. miRNA sponge（海绵）载体构建：靖瑞百康通过构建载体，表达包含多个成熟miRNA结合位点的RNA序列，通过吸附结合成熟miRNA，从而抑制miRNA的作用，从而进行功能缺失性研究。
miRNA sponge的特点：
a. 由于miR Sponges是由质粒编码的，它能够通过真核表达载体达到稳定沉默细胞microRNA的目的；
b. 能够沉默整个家族的microRNA以达到对整个家族microRNA功能的研究；
c. 可以利用miR Sponges实现体内外loss of function研究；
d. 可以用来检测luciferase靶基因报告系统分析；
e. 可以自由组合串联不同miRNA抑制子序列，达到沉默多种不同miRNA的目的。
使用这种构建方式，客户需提供miRNA的具体信息、预构建miRNA inhibitor的重复数及预构建inhibitor的序列信息，我们完成序列合成，质粒构建。
目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
C09004 | 质粒型microRNA 抑制子载体-2 (microRNA inhibitor sponge, 3重复) | 质粒5ug+甘油菌一管 | ￥1,500 | 1-2周 |
目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
A08005 | 双荧光素酶报告实验载体构建(≤500bp)a | 质粒5ug+甘油菌一管 | ￥2,000 | 1-2周 |
A08006 | 双荧光素酶报告实验突变载体构建（种子区突变）b | 质粒5ug+甘油菌一管 | ￥2,000 | 1-2周 |
目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
A06001 | 慢病毒干扰载体 LV-1 (pLVXU6/GFP) | 质粒5ug+甘油菌一管 | 1000 | 2周 |
A06002 | 慢病毒干扰载体 LV-2 (ppLVXU6/Puro) | 质粒5ug+甘油菌一管 | 1000 | 2周 |
A06003 | 慢病毒干扰载体 LV-3 (ppLVXU6/GFP+Puro) | 质粒5ug+甘油菌一管 | 1000 | 2周 |
A06004 | 慢病毒干扰载体 LV-9 (ppLVXU6/RFP) | 质粒5ug+甘油菌一管 | 1000 | 2周 |
靖瑞百康公司已经利用自己的miRNA载体骨架成功构建为数众多的miRNA的过表达载体，载体库中的miRNA expression vectors 1-2周内即可出库，性价比极高！
| Name | Accession | Species | Seqence |
| hsa-miR-155 | MIMAT0000646 | Homo sapiens | UUAAUGCUAAUCGUGAUAGGGGU |
| hsa-miR-106b | MIMAT0000680 | Homo sapiens | UAAAGUGCUGACAGUGCAGAU |
| hsa-let-7a | MIMAT0000062 | Homo sapiens | UGAGGUAGUAGGUUGUAUAGUU |
| hsa-miR-15a | MIMAT0000068 | Homo sapiens | UAGCAGCACAUAAUGGUUUGUG |
| hsa-miR-16 | MIMAT0000069 | Homo sapiens | UAGCAGCACGUAAAUAUUGGCG |
| hsa-miR-17 | MIMAT0000070 | Homo sapiens | CAAAGUGCUUACAGUGCAGGUAG |
| hsa-miR-143 | MIMAT0000435 | Homo sapiens | UGAGAUGAAGCACUGUAGCUC |
| hsa-miR-145 | MIMAT0000437 | Homo sapiens | GUCCAGUUUUCCCAGGAAUCCCU |
| hsa-miR-125b | MIMAT0000423 | Homo sapiens | UCCCUGAGACCCUAACUUGUGA |
| hsa-miR-218 | MIMAT0000275 | Homo sapiens | UUGUGCUUGAUCUAACCAUGU |
| hsa-miR-451 | MIMAT0001631 | Homo sapiens | AAACCGUUACCAUUACUGAGUU |
| hsa-miR-148a | MIMAT0000243 | Homo sapiens | UCAGUGCACUACAGAACUUUGU |
| hsa-miR-122 | MIMAT0000421 | Homo sapiens | UGGAGUGUGACAAUGGUGUUUG |
| dre-miR-737 | MIMAT0003768 | Danio rerio | AAUCAAAACCUAAAGAAAAUA |
| hsa-miR-21 | MIMAT0000076 | Homo sapiens | UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA |
| hsa-miR-194 | MIMAT0000460 | Homo sapiens | UGUAACAGCAACUCCAUGUGGA |
| hsa-miR-150 | MIMAT0000451 | Homo sapiens | UCUCCCAACCCUUGUACCAGUG |
| hsa-miR-491-5p | MIMAT0002807 | Homo sapiens | AGUGGGGAACCCUUCCAUGAGG |
| hsa-miR-15b | MIMAT0000417 | Homo sapiens | UAGCAGCACAUCAUGGUUUACA |
| hsa-miR-29b | MIMAT0000100 | Homo sapiens | UAGCACCAUUUGAAAUCAGUGUU |
| hsa-miR-30a | MIMAT0000087 | Homo sapiens | UGUAAACAUCCUCGACUGGAAG |
| hsa-miR-29c | MIMAT0000681 | Homo sapiens | UAGCACCAUUUGAAAUCGGUUA |
| hsa-miR-195 | MIMAT0000461 | Homo sapiens | UAGCAGCACAGAAAUAUUGGC |
| hsa-miR-7 | MIMAT0000252 | Homo sapiens | UGGAAGACUAGUGAUUUUGUUGU |
| hsa-miR-886-5p | MIMAT0004905 | Homo sapiens | CGGGUCGGAGUUAGCUCAAGCGG |
| hsa-miR-182 | MIMAT0000259 | Homo sapiens | UUUGGCAAUGGUAGAACUCACACU |
| hsa-miR-497 | MIMAT0002820 | Homo sapiens | CAGCAGCACACUGUGGUUUGU |
| hsa-miR-375 | MIMAT0000728 | Homo sapiens | UUUGUUCGUUCGGCUCGCGUGA |
| hsa-miR-26b | MIMAT0000083 | Homo sapiens | UUCAAGUAAUUCAGGAUAGGU |
| hsa-miR-128 | MIMAT0000424 | Homo sapiens | UCACAGUGAACCGGUCUCUUU |
| hsa-miR-200b | MIMAT0000318 | Homo sapiens | UAAUACUGCCUGGUAAUGAUGA |
| hsa-miR-320a | MIMAT0000510 | Homo sapiens | AAAAGCUGGGUUGAGAGGGCGA |
| hsa-miR-196b | MIMAT0001080 | Homo sapiens | UAGGUAGUUUCCUGUUGUUGGG |
| mmu-miR-19b | MIMAT0000513 | Mus musculus | UGUGCAAAUCCAUGCAAAACUGA |
| hsa-let-7c | MIMAT0000064 | Homo sapiens | UGAGGUAGUAGGUUGUAUGGUU |
| hsa-miR-9 | MIMAT0000441 | Homo sapiens | UCUUUGGUUAUCUAGCUGUAUGA |
| hsa-miR-373 | MIMAT0000726 | Homo sapiens | GAAGUGCUUCGAUUUUGGGGUGU |
| hsa-miR-338-3p | MIMAT0000763 | Homo sapiens | UCCAGCAUCAGUGAUUUUGUUG |
| hsa-miR-98 | MIMAT0000096 | Homo sapiens | UGAGGUAGUAAGUUGUAUUGUU |
| hsa-miR-214 | MIMAT0000271 | Homo sapiens | ACAGCAGGCACAGACAGGCAGU |
| dre-miR-16a | MIMAT0001774 | Danio rerio | UAGCAGCACGUAAAUAUUGGUG |
| bta-miR-139 | MIMAT0003788 | Bos taurus | UCUACAGUGCACGUGUCUCCAGU |
| bta-miR-30d | MIMAT0003533 | Bos taurus | UGUAAACAUCCCCGACUGGAAGCU |
| hsa-miR-26a | MIMAT0000082 | Homo sapiens | UUCAAGUAAUCCAGGAUAGGCU |
2：miRNA mimics模拟物化学合成
miRNA mimics是miRNA 的模拟物，为化学合成的成熟miRNA双链，能增强内源性miRNA功能。包括一条与目标miRNA成熟体序列一致的序列，
以及一条与miRNA成熟体序列互补的序列。本公司合成的miRNA minics涵盖了miRBase数据库中人、小鼠和大鼠几乎所有的miRNA，模拟生物体内源的
miRNA，特异性增强内源性miRNA的功能。同时本公司可以为客户提供不同形式、不同长度以及由客户自行设计的miRNA，方便客户选择。
microRNA标准序列来自miRBase（http://www.mirbase.org/）。
| 产品名称 | Amount(nmol) | 交货期 | |||
| 2od | 4od | 8od | ＞10od | ||
miRNA Mimics | 450 元 | 询价 | 询价 | 询价 | 1～2周 |
miRNA Mimics nagetive control | 300 元 | 询价 | 询价 | 询价 | 1～2周 |
我司合成的miRNA mimics 产品能够被转染到相应的目的细胞中，模拟microRNA的作用，还可以用于验证靶基因与miRNA的之间的关系。
靶基因表达水平验证： 通过对转染miRNA mimics和mimics 阴性对照的细胞中mRNA靶基因进行western Blotting和实时荧光定量RCR检测，能够检测靶基因蛋白的表达水平，验证miRNA与靶基因之间的调控关系。
3'UTR荧光素酶验证：将预测的miRNA 3’UTR结合靶位点构建到质粒上，并将miRNA mimics和质粒共转染细胞，miRNA mimics阴性对照作为参照，miRNA mimics可以抑制质粒上的报告基因，从而可以直观的检测miRNA mimics与miRNA预测结合位点之间的作用关系。
| 1.质量保证 | 2.发货时间 | 3.售后处理 |
| 我司产品发货前均经过质量检测，确保您收到的产品质量准确无误！ | Generaybio拥有大量的现货产品，本公司的现货产品从订货日期起一周以内即可到货，大大缩短了您的等待时间！另外Generaybio的快速克隆及病毒包装平台也能让您体验到前所未有的快速定制服务！ | Generaybio所售出的产品全部登记在册，如果您拿到我们的产品觉得和实质不相符或存在问题，您只需要告诉我们相关产品信息我们会迅速做出反应，为您提供解决方案 |
| 4.订购流程 | 5.联系我们 | 6.相关服务： |
| 联系我们→技术人员或销售人员与您沟通→签订合同→支付预付款→执行项目→确认收货→支付尾款→售后服务 | Generaybio提供免费的技术咨询，任何关于产品或者技术问题，都可以联系我们们。 免费热线：13321116807 服务邮箱：info@generaybio.com | 基因合成，亚克隆构建，3’UTR验证实验 启动子合成及验证，慢病毒包装 腺病毒包装。腺相关病毒包装 稳转株构建 |