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GST pull down
| 货号 | 规格 | 货期 | 价格 |
| FI8804-20T | 20次 | 现货 | |
| FI8804-40T | 40次 | 现货 |
GST pull down技术是体外条件下研究蛋白质相互作用的方法。先将体外表达的GST融合蛋白结合到谷胱甘肽Beads上，再将靶蛋白-GST-Beads和细胞裂解液孵育，这样互作蛋白便一起吸附在Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后，再用洗脱液将互作蛋白复合物从Beads洗脱下来，即GST pull down产物。这种互作复合物既可以用Western Blot检测已知蛋白，也可用质谱鉴定出未知蛋白。
靖瑞百康10年科研服务经验，专业提供分子互作实验服务，包括蛋白与蛋白、蛋白与DNA、蛋白与RNA、RNA与RNA的相互作用技术，经验丰富，实验结果稳定可靠。
我公司自有分子、细胞和质谱实验平台，能执行最优的实验路线，对微量互作蛋白的质谱鉴定有充足把控力，对后续功能分析有独到见解。
我们不仅会提供专业的售前方案建议、而且售后技术支持将一直保持到文章发表，确保您安心进行下游实验及投稿。
目前，客户已在Nature子刊、Oncogene、Cell Research等高水平期刊成功发表大量高分文章（点击查看客户文献）。
蛋白-蛋白间的相互作用是蛋白质发挥生物学功能的主要模式，蛋白质会通过结合不同的伙伴来行驶不同的功能，形成复杂的信号转导网络。常见的蛋白相互作用方法主要有免疫共沉淀（Co-IP）、pull down、酵母双杂交、荧光双分子互补（BiFC）、荧光共定位等。
pull down技术将目标蛋白进行体外原核表达，使标签蛋白（GST或His等）与目标蛋白融合表达，借助标签的亲和介质将目标蛋白纯化出来，可以不受抗体、物种限制，比较轻松的获得目标蛋白的结合蛋白，还可以通过外源同时表达目标蛋白和待测蛋白，确定它们是否发生直接的相互作用，或者确定两个蛋白结合的结构域，但该方法无法得知体内真实的结合情况。
| 服务项目 | 服务内容 | 结果交付 | 实验周期 | 客户提供 | 价格 |
GST pull down WB （验证型） | 诱饵蛋白原核表达载体构建（选做） | 载体质粒、测序结果和实验报告 | 4-5周 | 诱饵基因质粒模板 实验样本 待测蛋白抗体 实验信息表 | |
| 诱饵蛋白原核表达和Western blot检测 | 诱饵蛋白Western blot检测图 | ||||
| 样本中待测蛋白的Western blot检测 | 待测蛋白Western blot检测图 | ||||
GST pull down捕获诱饵蛋白及其互作蛋白 （实验组、空载对照组） | 诱饵蛋白Western blot检测图 pull down实验报告 | ||||
GST pull down MS （筛选型） | 诱饵蛋白原核表达载体构建（选做） | 载体质粒、测序结果和实验报告 | 6-7周 | 诱饵基因质粒模板 实验样本 实验信息表 | |
| 诱饵蛋白原核表达和Western blot检测 | 诱饵蛋白Western blot检测图 | ||||
GST pull down捕获诱饵蛋白及其互作蛋白 （实验组、GST对照组、裂解液对照组） | 诱饵蛋白Western blot检测图 pull down实验报告 | ||||
| LC-MS/MS检测及数据分析 | 质谱检测结果及报告 互作蛋白筛选表格 生物信息学分析结果和报告 |
样本类型 | GST pull down WB建议送样量 | GST pull down MS建议送样量 |
| 动物细胞 | 3*10e7个细胞/组（约3个10cm皿） | 5*10e7个细胞/组（约5个10cm皿） |
| 动物组织 | 1g/组 | 2g/组 |
| 植物叶片 | 2g/组 | 4g/组 |
| 植物根或果实 | 4g/组 | 8g/组 |
| 菌体 | 50ul菌体沉淀/组 | 100ul菌体沉淀/组 |
▲注意：这里列出的均为每组样本的送样量，如果实验和对照组用的样本一致，此样本量*2。详细送样指南可联系靖瑞百康客服或销售索取。
保存及运输：-80℃保存，干冰取样/运输，至少在送样前2天通知我司。
GST pull down WB结果图（阳性）
GST Pull-down MS：Western blot检测图
GST pull-down MS：质谱检索表格（部分展示）
GST pull-down MS：互作蛋白生信分析结果（部分展示）
Chen S.L. et al: A GYS2/p53 Negative Feedback Loop Restricts Tumor Growth in HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. Cancer Research. 2018. (中科院1区，IF=13.312).
糖代谢异常是癌症的突出特征，作者前期研究发现肝细胞癌(HCC)中糖原含量降低，并与患者总体生存情况不良相关，探索HCC中的异常糖代谢机制或许可以为肝细胞癌的治疗提供新靶点。本研究首次报道了HCC组织中的糖原含量显著降低，并与患者的不良预后相关，这归因于新发现的HBx/GYS2/p53信号轴。低表达的GYS2促进HCC细胞增殖而非迁移，并提供了两条独立的证据来支持GYS2和p53之间的关系。一方面，GYS2与MDM2竞争结合p53，以稳定p53免于蛋白酶体降解；另一方面，p53以负反馈方式抑制GYS2表达和糖原含量。这些数据表明p53和GYS2可能通过平衡彼此的表达而在HCC中发挥功能。
 | 1. Yu C.P. et al: Flot2 acts as a novel mediator of podocyte injury in proteinuric kidney disease. 2023. Int J Biol Sci. 2区, IF=10.75. |
| 2. Chen S.L. et al: A GYS2/p53 Negative Feedback Loop Restricts Tumor Growth in HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. 2018. Cancer Research. 1区, IF=13.312. |
| 3. You H. J. et al: Hepatitis B virus X protein promotes vimentin expression via LIM and SH3 domain protein 1 to facilitate epithelial-mesenchymal transition and hepatocarcinogenesis. Cell. 2021. Commun Signal. 2区, IF=8.4. 使用相关技术: GST-pull down实验，gst pull down-ms实验，LC-MS/MS蛋白质谱鉴定 |
| 4. Wang J. et al: ENO1 Binds to ApoC3 and Impairs the Proliferation of T Cells via IL-8/STAT3 Pathway in OSCC. 2022. Int J Mol Sci. 2区, IF=6.208. 【研究内容】：α-烯醇化酶(ENO1)是一种代谢酶，与口腔鳞状细胞癌(OSCC)淋巴转移有关。本研究通过GST pull down MS寻找与转移性OSCC患者术后淋巴引流液（PLD）中的ENO1相互作用的蛋白，发现了ENO1的新互作蛋白ApoC3。两者的结合引起白细胞介素(IL)-8的产生，进而激活Jurkat T细胞STAT3信号通路，促进细胞凋亡，抑制Jurkat T细胞增殖。 使用相关技术: GST pull-down MS实验，gst pulldown实验，LC-MS/MS质谱鉴定 |
