在线客服
客服电话
客服电话
优惠信息
siRNA/miRNA/circRNA
病毒包装
分子生物服务
细胞系服务
分子生物产品
技术中心
关于我们
miRNA sponege 构建
miRNA sponge
相对于常规基因来讲miRNA的功能丧失（loss-of-function）研究是难题，常用的RNAi技术在这里却不好用。成熟的miRNA与siRNA不相容，因为它们两者都能进入RISC复合物；pre-miRNA是茎环结构的，siRNA无从下手；pri-miRNA貌似是siRNA最容易靶定的，但一个是细胞核，一个在细胞质。
2007年，麻省理工大学的Phillip Sharp及他的同事，开发出一种长期抑miRNA基因的高效方法,他们称之为miRNA海绵（miRNA sponge）。miRNA海绵是一条mRNA，其3’非翻译区（UTR）包含若干个miRNA靶定位点（如下图）。更重要的是，这些靶定位点在RISC切割位点有一些错配。这样，抑制剂mRNA就不会被降解，而与RISC复合物稳定结合，让它远离天然的mRNA靶点。
经研究证实，这些miRNA海绵是高效的miRNA抑制剂，其效力与反义寡核苷酸相当。由于miRNA与靶点的相互作用是依赖种子区域（seed region，miRNA的第2-8位），这样miRNA海绵对家族中亲缘关系接近的所有miRNA都有效，即特异性不高，这也有利有弊。制备某个家族缺陷的转基因小鼠变得相当容易。但如果你想要了解某个miRNA的特定功能，那就得将与之接近的miRNA全部去除。
作者做了这样的验证实验：将miR-20和miR-21结合的位点构建到荧光素酶载体上，和miR-sponge表达质粒共转hela细胞，结果显示转染miR-sponge组的荧光素酶表达明显高于对照组。
miRNA海绵的应用很广。它可用于靶点预测的验证，也能分析miRNA的功能丧失表型。由于miRNA海绵是由表达质粒编码的，那么它也很容易推广到其它形式，譬如慢病毒、腺病毒或转基因，适合各种不同的细胞类型。Sharp还在研究中证实，在UTR上多加几个miRNA结合位点，能增加反义序列的量，从而提高海绵的效力。从原理上来说，miRNA海绵的CMV启动子也可以换成其它组织特异的启动子，让它们在果蝇、植物等模式生物中起作用。
我司常用miRNAsponge慢病毒表达载体如下：
参考文献：
1. Margaret S Ebert, et al. MicroRNA sponges: competitive inhibitors of small RNAs in mammalian cells. Nature Methods 4, 721 - 726 (2007)
| 1.质量保证 | 2.发货时间 | 3.售后处理 |
| 我司产品发货前均经过质量检测，确保您收到的产品质量准确无误！ | Generaybio拥有大量的现货产品，本公司的现货产品从订货日期起一周以内即可到货，大大缩短了您的等待时间！另外Generaybio的快速克隆及病毒包装平台也能让您体验到前所未有的快速定制服务！ | Generaybio所售出的产品全部登记在册，如果您拿到我们的产品觉得和实质不相符或存在问题，您只需要告诉我们相关产品信息我们会迅速做出反应，为您提供解决方案 |
| 4.订购流程 | 5.联系我们 | 6.相关服务： |
| 联系我们→技术人员或销售人员与您沟通→签订合同→支付预付款→执行项目→确认收货→支付尾款→售后服务 | Generaybio提供免费的技术咨询，任何关于产品或者技术问题，都可以联系我们们。 免费热线：13321116807 服务邮箱：info@generaybio.com | 基因合成，亚克隆构建，3’UTR验证实验 启动子合成及验证，慢病毒包装 腺病毒包装。腺相关病毒包装 稳转株构建 |
>