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当前位置: 首页>miRNA/siRNA>shRNA载体构建

 

三保一shRNA敲减套餐

 

     shRNA的构建:

慢病毒表达载体中,是由 RNA 聚合酶Ⅲ启动子来指导 RNA 合成的,这是因为RNA 聚合酶Ⅲ

有明确的起始和终止序列,而且合成的 RNA 不会带 poly A 尾。当 RNA 聚合酶Ⅲ遇到连续 4 个

或 5 个 T 时,它指导的转录就会停止,在转录产物 3’端形成 1~4 个 U。U6 和 H1RNA 启动

子是两种 RNA 聚合酶Ⅲ依赖的启动子,其特点是启动子自身元素均位于转录区的上游,适合

于表达~19nt RNA 和~50nt RNA 茎环结构(stem loop)。在 siRNA 表达载体中,可由

载体直接表达小发卡状 RNA(small hairpin RNA, shRNA),载体内的位于 RNA聚合酶Ⅲ

启动子和 4~5T转录终止位点之间的茎环结构序列,转录后可折叠成具有 1~4 个U. 3 ' 突出

端的茎环结构,在细胞内进一步加工成 siRNA。

常用载体图谱:

plko.1 Map.png

Plvx-shRNA2-ZsGreen1-T2A-Puro Map.png

构建shRNA表达载体,实现shRNA在细胞中稳定表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足。

服务流程:

1)mRNA序列分析;

2)引物设计及合成;

3)单链互补引物退火;

4)将片段克隆至载体;

5)测序以确保插入序列正确性;

 

 

客户提供:

目的基因的Accession Number(Human、Mouse或Rat种属);

我们提供:

1) 构建好的表达载体和相应的甘油菌;赠送阴性对照甘油菌;

2) 测序报告 ;

质量保证:

针对某靶基因设计的3条shRNA序列,在转染效率>80%的前提下,我们保证至少有1个克隆可以达到70%转录水平的沉默效率。

1.质量保证2.发货时间3.售后处理
我司产品发货前均经过质量检测,确保您收到的产品质量准确无误!Generaybio拥有大量的现货产品,本公司的现货产品从订货日期起一周以内即可到货,大大缩短了您的等待时间!另外Generaybio的快速克隆及病毒包装平台也能让您体验到前所未有的快速定制服务!Generaybio所售出的产品全部登记在册,如果您拿到我们的产品觉得和实质不相符或存在问题,您只需要告诉我们相关产品信息我们会迅速做出反应,为您提供解决方案
4.订购流程5.联系我们6.相关服务:
联系我们→技术人员或销售人员与您沟通→签订合同→支付预付款→执行项目→确认收货→支付尾款→售后服务Generaybio提供免费的技术咨询,任何关于产品或者技术问题,都可以联系我们们。 免费热线:13321116807 服务邮箱:info@generaybio.com

基因合成,亚克隆构建,3’UTR验证实验

启动子合成及验证,慢病毒包装

腺病毒包装。腺相关病毒包装

稳转株构建

 



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