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CircRNA pull-down试剂盒
| 产品名称 | 货号和规格 | 产品说明书 | 价格 |
CircRNA pull down试剂盒（动物） | FI8710，12/24次 |
辉骏生物自主研发的 circRNA pull-down 试剂盒（已获得国家知识产权局发明专利授权），利用“F2标签”与其特异性配体的强亲和力，高效调取细胞中的目标cirRNA及其结合蛋白。F2标签是一段短的RNA序列，与目标circRNA连接后，几乎不影响其结构和功能。
实验前先将F2标签序列与目标circRNA序列连接，构建成F2-circRNA过表达载体，转染并裂解目的细胞，之后采用特异性配体磁珠来调取F2-circRNA及其结合蛋白。去除未结合的蛋白后，可以采用多种方法洗脱蛋白质。分离的蛋白产物既可以用Western blot检测已知蛋白，也可以用质谱（LC-MS/MS）鉴定未知蛋白。
蛋白-蛋白间的相互作用是蛋白质发挥生物学功能的主要模式，蛋白质会通过结合不同的伙伴来行驶不同的功能，形成复杂的信号转导网络。以下列举了可应用pull down试剂盒的几个研究方向或研究领域：
1. 确定2个蛋白是否具有直接相互作用；
2. 确定蛋白之间结合的结构域；
3. 病毒、细菌等病原体侵染宿主细胞的机制；
4. 酶和底物的作用机制；
5. 蛋白调控复合体的研究。
1、调取效率高：F2标签序列与F2配体磁珠具有很强亲和力，能够高效调取F2-circRNA及其结合蛋白； 2、不受circRNA接口处序列限制，适用于各种序列的circRNA； 3、F2标签很短，只有16nt，几乎不影响目标RNA的结构或功能； 4、洗脱液适配后续Western Blot及质谱（LC-MS/MS）实验。 5、操作简便，耗时短，适用于初学者。
1. 构建F2-circRNA表达载体，转染目标细胞并进行表达检测；
2. 裂解样本，同时制备F2配体磁珠；
3. 将细胞裂解液加入F2配体磁珠中，4 ℃孵育2~4 h；
4. 漂洗、洗脱得到目标蛋白及其互作蛋白复合物。
circrna pulldown WB结果图（阳性）
circrna pull-down MS：质谱检索表格（部分展示）
1. Fumarate induces LncRNA-MIR44352HG to regulate glutamine metabolism remodeling and promote the development of FHdeficient renal cell carcinoma. Cell Death and Disease. 2024. IF=9.2.
2. A positive feedback between PDIA3P1 and OCT4 promotes the cancer stem cell properties of esophageal squamous cell carcinoma. Cell Communication and Signaling. 2024. IF=8.4.
3. Min X.L. et al: miR-758-3p Interferes with Neuronal Apoptosis in Cerebral Ischemia–Reperfusion by Inhibiting ILK. 2025. 2区, IF=4.3.
